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当前位置:上海研生实业有限公司>> 50次丁香染料法PCR鉴定试剂盒说明书

丁香染料法PCR鉴定试剂盒说明书

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参  考  价:¥ 4899
具体成交价以合同协议为准
  • 产品型号:50次
  • 品牌:
  • 产品类别:分子生物学仪器
  • 所在地:上海市
  • 信息完整度:
  • 样本:
  • 更新时间:2023-07-27 13:23:45
  • 浏览次数:5
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经销商

  • 经营模式:经销商
  • 商铺产品:4671条
  • 所在地区:上海上海市
  • 注册时间:2023-07-24
  • 最近登录:2023-07-27
  • 联系人:刘小姐 (销售经理)
产品简介

丁香染料法PCR鉴定试剂盒说明书原理是由一对引物介导,能在动植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增,经过n个热循环扩增,扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的(1+E)n(0<E<1,扩增效率=倍,使得检测扩增产物中的特定基因成为可能。

详情介绍

适用范围【参考值】
1.试剂盒有效性判定:
(1)阳性对照:有典型S型扩增曲线或Ct值≤35。
(2)阴性对照:Ct值>38或无Ct值,线形为直线或轻微斜线,无指数增。
2.标本结果判定:
(1)阳性:标本检测结果Ct值≤35或有明显指数增。
(2)可疑:标本检测结果Ct值在35~38范围内。此时应对标本进行重复检测,如重复实验结果Ct值仍在35~38范围内,有明显指数增,则判定为阳性,否则为阴性。
(3)阴性:标本检测结果Ct值>38或无Ct值。

参数规格:
产品名称:丁香染料法PCR鉴定试剂盒说明书
英文名称:Flos caryophylli     
货号:YSP8650
产品规格:50次
产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年

实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
    10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1(10pM)               2μl
      引物2(10PM)              2μ
      Taq酶(2U/μl)            1μl
      DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
      加ddH2O至               50 μl
   视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测
三、注意事项
1.PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行。好设立一个的PCR实验室。
2.纯化模板所选用的方法对污染的风险有影响。一般而言,只要能够得到可靠的结果,纯化的方法越简单越好。
3.所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
活性炭 AR,200目,粉末状,褐色 1-(4-氧基-3-(3-氧基氧基)苯基)-3-基-1-酮富含酵母抽提物Human IGF2R(Insulin Like Growth Factor 2 Receptor) ELISA Kit

Human IGFALS(Insulin Like Growth Factor Binding Protein, Acid Labile Subunit) ELISA Kit

活性炭 CP,200目,粉末状,褐色 3-十四烷基噻吩Human IgG1(Immunoglobulin G1) ELISA Kit

Human IgG2(Immunoglobulin G2) ELISA Kit

活性炭颗粒 AR,20-50目 2,6-二基L-焦谷氨醇Human IgG3(Immunoglobulin G3) ELISA Kit

Human IgG4(Immunoglobulin G4) ELISA Kit

活性炭 电镀脱色,40-60目,from Nutshell 2,6-二基姜黄素Human IL10Rβ(Interleukin 10 Receptor Beta) ELISA Kit

Human IL-13(Interleukin 13) ELISA Kit

活性炭 电镀脱色,200目,from wood 2,4-二氟苯酸酯Human IL-17A(Interleukin 17 A) ELISA Kit

Human IL-19(Interleukin 19) ELISA Kit

活性炭 催化剂载体,8-16目 6(5H)-5-氮杂菲酮5-基-2(1H)吡啶酮Human IL-23(Interleukin 23) ELISA Kit

Human IL-35(Interleukin 35) ELISA Kit

活性炭 净水、气体纯化,棒,φ1.0mm 4-氨基-6-氯-2-硫基嘧啶植酸钙Human INHB(Inhibin B) ELISA Kit

Human INSL5(Insulin Like Protein 5) ELISA Kit

活性炭 净水、气体纯化,10-24目 1-基-6,7,8-三氟-1,4-二-4-氧代-3-喹啉酸酯2-二苯基基亚砜基酸Human IRF5(Interferon Regulatory Factor 5) ELISA Kit

Human ITLN2(Inectin 2) ELISA Kit

活性炭 净水、气体纯化,棒,φ4.0mm 3-基吡啶-N-氧化物果胶酶Human KERA(KeRatocan) ELISA Kit

Human LACTβ(β-Lactamase) ELISA Kit

活性炭 药物脱色,200目 二酸单酯Human LAMA4(Laminin Alpha 4) ELISA Kit

Human LAT(Linker For Activation of T-cell) ELISA Kit
丁香染料法PCR鉴定试剂盒说明书 醇酸钠 98%5-己烯-1-醇 97%(D-Tyr11)-Neurotensin

 1-萘酚3-羧基苯磺酸钠 97%三氟烷磺酸 99%Neurotensin (1-6)

 二苯胺磺酸钡草酸 AR,99.5%三氟烷磺酰氯 99%Neurotensin (1-8)

 对羟基苯酸草酸 CP,99.5%毒死蜱 分析标准品,99%Neurotensin (1-11)

 半二酚橙草酸 GR,99.8%毒死蜱Neurotensin (8-13)

 对阱草酸 SP氟铃脲 分析标准品,99%Acetyl-Neurotensin (8-13)

 亚硝酸钴钾草酸 99.99% metals basis氟铃脲(Dab9)-Neurotensin (8-13)

 亚硝酸钴钠草酸 ACS霜灵 分析标准品,98%(Lys8,Lys9)-Neurotensin (8-13)

 邻苯二酚紫草酸 Standard for GC,≥99.6% 霜灵(Lys9,Trp11,Glu12)-Neurotensin (8-13) (Cyclic Analog)

 二苯胍草酸 ≥99.998% (metals basis)分析标准品,99%Neurotensin (9-13) 
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论

 

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