描述:(1)公司可提供新鲜或冻存细胞株;(2)细胞株数量约 5×105/瓶;(3)不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
发货:客户可根据自身科研项目的需要选择不同类型的细胞培养瓶和相应的细胞密度。发货的新鲜细胞还包含:1、发货的T25方瓶中装满50ml左右培养基;2、说明书及注意事项;3、售后服务标准。
保存和应用:客户可以根据自己的需求选择新鲜或者冻存的原代细胞,如是新鲜细胞株,客户收到细胞后应立即将其放入CO2细胞培养箱内静置后2-3h,再进行后续的实验操作。如是冻存细胞,客户收到细胞后应立即将其放入液氮、-80℃冰箱或立即进行复苏。该细胞只可用于科研,不得用于临床应用。
产品名称 | 规格 | 货号 |
CNE-1高分化鼻咽癌细胞厂家 | T25m2 | YS-X6340 |
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
培养操作:
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取.
25(OH)D3/25 HVD3(Mouse 25-Dihydroxy vitamin D3) ELISA Kit 小鼠25羟基3(S)-3-氨基-1,2-二醇 98%2-(二-叔膦)-2'-基联苯 98%Macrococcus spp.
25(OH)D3/25 HVD3(Human 25-Dihydroxy vitamin D3)ELISA Kit 人25羟基31-(2-氨基基)哌啶 98%1,3-二异基咪唑氯 97%Madurella grisea
25(OH)D3/25 HVD3 ELISA Kit 大鼠25羟基34-氨基吲哚 97%(1,5-环辛二烯)氯化钌, 聚合物 95%Madurella mycetomatis
2,3-DPG(Human 2,3-Disphosphoglycerate,2) ELISA Kit 人2,3-二磷酸甘油酸2-氨基-5-溴吡嗪 98%二氯(五基环戊二烯基)合钌(III)聚合物 98%Madurella spp.
17-OHP(Mouse 17-Hydroxyprogesterone)ELISA Kit 小鼠17羟孕酮N-酰基-4-哌啶酮 98%Dichlorobis(2-(二苯基膦)胺)钌(II) 95%Maedi-Visna Virus(MVV)-
17-OHP(Human 17-Hydroxyprogesterone) ELISA Kit 人17羟孕酮5-氨基-3-基异噻唑 盐酸盐 97%Dichlorobis(2-(diisopropylphosphino)-胺)钌(II) 97%Malleomyces mallei
17-OHP ELISA Kit 大鼠17羟孕酮2-酰基苯并噻吩 98%二(对伞花烃)钌(II)二聚体 97%Mannheimia glucosida
17-OHCS(Human 17-Hydroxycorticosteroids) ELISA Kit 人17羟皮质类固醇2-氨基-4-基苯并噻唑 98%二氯(2,6,10-十二碳三烯-1,12-二基)钌(IV) 97%Mannheimia granulomatis
17-OHCS ELISA Kit 大鼠17羟皮质类固醇N-叔基-十异喹啉-3(S)-酰胺 97%氯二(烯基)铑(I)二聚体 98%Mannheimia haemolytica
17-KS(Human 17-ketosteroids) ELISA Kit 人17-酮类固醇4-溴基喹啉-2-酮 97%四羰基二氯化二铑 97%Mannheimia ruminalis
CNE-1高分化鼻咽癌细胞厂家4-氟-3-硝基三氟苯 99% 6-苯基-3-哒嗪酮冻干黑莓粉Human MYH1(Myosin-1) ELISA Kit
Human GLUL(Glutamine synthetase) ELISA Kit
5-氟-2- 97% 2-氨基-5-叔基噻吩-3-酸酯冻干树莓粉Human UBB(Polyubiquitin-B) ELISA Kit
Human S100A16(Protein S100-A16) ELISA Kit
2,4-二基吡啶 97% 2-氨基嘧啶-4-羧酸冻干蔓越莓粉Human PGC(Gastricsin) ELISA Kit
Human IDUA(Alpha-L-iduronidase) ELISA Kit
4-氨基三氟苯 98% 4-(4-基-1-)苄胺冻干蓝莓粉Human NAGLU(Alpha-N-acetylglucosaminidase) ELISA Kit
Human PF4(Plaet factor 4) ELISA Kit
3,5-二氨基三氟苯 98% 3-硝基-2-羧基苯酸酯冻干草莓粉Human GLA(Alpha-galactosidase A) ELISA Kit
Human COL3A1(Collagen alpha-1(III)chain) ELISA Kit
苄基三苯基溴化膦 98% 环酰酮小米提取物Human GAA(Lysosomal alpha-glucosidase) ELISA Kit
Human BDH1(D-beta-hydroxybutyRate dehydrogenase, mitochondrial) ELISA Kit
基三苯基氯化膦 98% 7-溴-1-氯异喹啉天然油Human COL4A1(Collagen alpha-1(IV)chain) ELISA Kit
Human NE(Neutrophil elastase) ELISA Kit
基三苯基溴化膦 99% 4-吗啉基苄胺山豆根提取物Human PSG3(Pregnancy-specific beta-1-glycoprotein 3) ELISA Kit
Human FABP4(Fatty acid-binding protein, adipocyte) ELISA Kit
苄基三苯基氯化磷 99% 2-酰基-5-溴吡啶天然琥珀酸酯Human NUCB2(Nucleobindin-2) ELISA Kit
Human IL5RA(Interleukin-5 receptor) ELISA Kit
三基氯硅烷 98% 3--4-硝基茴香醚香菜提取物Human RLN3(Relaxin-3) ELISA Kit
Human RRM1(Ribonucleoside-diphosphate reductase large subunit) ELISA Kit
培养细胞冻存方案:
以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案,必须参阅针对具体细胞的产品说明书。
1.配制冻存培养基,于2°C至8°C下储存,直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。
2.冻存贴壁细胞时,利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需培养基重新悬浮细胞。
3.采用、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用 Countess®自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度,计算冻存培养基需要量。
4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液,不要搅动细胞沉淀。
注:离心速度和时间取决于细胞种类。
5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀,将其调整至该细胞适合的活细胞密度。
6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时,应不时轻轻混合细胞,使其保持均匀的细胞悬液状态。
7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞,使温度每分钟大约降低 1°C。或者,将装有细胞的冻存管放入冻存盒中,然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。
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