透射光显微镜的价格和重要参数
在透射徕卡显微镜下,从复型膜上看到的裂面显微镜不外两类:一是垂直于膜断裂的,其结构与超薄切片所显示的类似,因而不难辨认.徕卡显微镜另一类是平行于膜裂开的。由于样品迅速冷冻,膜的脂双层疏水区结合力较弱,显微镜生物膜常沿此区断裂,从而暴露出膜的内部结构,如(图7一1)所示。因此,这种方法是研究生物膜结构的重要手段。
偏光显微镜样品的预处理,需要特别提出的是样品在冷冻前应经冷冻保护剂的预处理。显微镜常用的冷冻保护剂有甘油、蔗糖、二甲基亚矾(DMSO)等,其中以徕卡显微镜甘油为。所用甘油浓度随所研究的组织的含水量而有不同,一般为20肠-40.含水量多的组织,甘油浓度应较大。在徕卡显微镜甘油内浸泡的时间伸缩性很大,有时需要过夜.由于很多生物膜不能耐受甘油的长时间浸泡,因此于浸泡前常需用戊二醛固定,以上过程均在冰箱内进行.下面是具体作法:
显微镜取材应迅速,并避免挤压组织.取下的组织浸入一滴预冷的固定液内,并用保险刀片将其切成长3mm,横径1-I. 5mm的小块,再放到固定液内,置4℃冰箱。显微镜常用固定液为2%-3%戊二醛。
固定15分钟后,可取出修块,偏光显微镜把修好的组组块再放入固定液内继续固定1-3小时。在此过程中要常常摇动样品,以增加固定效果。
冷冻保护剂浸渍,固定后的组织块,经。. lmol/L磷酸缓冲液(pH7. 2^-7.4)反复洗涤0. 5-1小时,再转入含适当浓度甘油的生理盐水中.对多数组织,甘油浓度可在25%-30%,浸渍时间至少要20分钟,偏光显微镜也可延至8^-24小时。
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