显微镜观察用细胞样品如何保存
徕卡显微镜固定的具体方法可参考常电镜样品制备方法，徕卡显微镜免疫电镜和电镜细胞化学各章。显微镜所谓包裹(Encapsulation)，显微镜就是利用某些大分子溶液浸透样品的过程.这些大分子不会穿过细胞膜而进入细胞，只能占据细胞间的空隙，显微镜包裹的目的也是为了防止超薄切片在制备过程中被破坏。这一步对于显微镜分散的细胞样品尤其必要。
显微镜用于包裹的物质有明胶，白蛋白，甲基纤维素、蔗糖等。下面以白蛋白为例，说明其具体方法.1.在一聚乙烯塑料管中加入牛血清白蛋白(BSA),BSA溶于0. lmol/L的磷酸缓冲液中，pH7. 2,浓度为10%^-20%;2.徕卡显微镜将经固定的组织块表面的残余液体用滤纸吸干，并迅速投入BSA中，3.显微镜一面振动塑料管，一面向其中逐滴加入25%的戊二醛，使管中戊二醛的最终浓度为2. 5 %;4.在上述条件下，BSA约在半分钟左右即可被戊二醛交连(聚合)，显微镜用保险刀片将塑料管壁切除。把聚合的BSA切成小方块，使其大小略大于包埋于其中的组织块。如果徕卡显微镜样品是游离细胞，可按下述步骤包裹:
1.将BSA加入一离心管内，显微镜浓度与上同;
2.把经过固定的细胞转入离心管;
3.在冷冻离心机上离心10分钟，800g, 40C;
4。去掉上清，数码显微镜在管底沉淀上加一滴用0. lmol/L磷酸缓冲液配制的10%的戊二醛，使残余的BSA交连;
5.用针把聚合后的团块拨起，切成小块。
为防止显微镜冷冻时生成大的冰晶而使结构破坏，组织需经冷冻保护剂处理，常用的冷冻保护剂有甘油(30%), DMSO (20%)和蔗糖(2.3mol/L)，均用缓冲液配制，显微镜组织在冷冻保护剂中浸泡的时间为0.5-1小时(室温)或过液((400.
为防止大的冰晶产生，数码显微镜除使用冷冻保护剂外，应采取速冻的办法，其基本要求与具体作法和冷冻断裂与蚀刻时相同，即将经数码显微镜冷冻保护的组织块投入用液氮冷却的氛里昂12内.
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