如何对陈旧奥林巴斯显微镜进行升级改造
奥林巴斯显微镜四氧化饿(Os0,)又称锹酸,它不是酸、如何对陈旧奥林巴斯显微镜进行升级改造
是强氧化剂.它对脂类、升级蛋白质固定效果较好,对核酸、多糖固定较差.实验证明,OsO;与脂类的初级作用发生在不饱和脂的双键部位,经过若干步骤,把相邻的脂交连起来。Os0,固定后,改造酶的活性丧失。OsO;的分子量较大,在组织中渗透较慢,因此,一般要求把组织块切成小于1mm3的小块,升级否则块的中心部分固定不好。Os为重金属元素,改造附着于细胞膜脂与蛋白质表面,增加结构的反差,是电子染色剂。
奥林巴斯显微镜甲醛的分子量较小,改造在组织中渗透快。单独使用时,保升级存微细结构的效果较差,但能保存某些酶的活性,改造在电镜细胞化学中使用。在一般样品固定时,有时甲醛与戊二醛混合使用效果不错。奥林巴斯显微镜一般甲醛中含有抗聚合的甲醉,如何对陈旧奥林巴斯显微镜进行升级改造
影响固定效果升级,因此电镜样品使用的甲醛,需用多聚甲醛粉末,在使用前配制。
改造固定剂渗透率以渗透深度d表示,d与固定时的温度t及升级系数k有以下关系。d=k了丁.
渗透率实验:①用2%戊二醛固定肝组织渗透较好的深度平均约升级为0. 7mm;室温3小时较好的固定仅为0.5mm , 奥林巴斯显微镜改造改造24小时1. 5mm,如何对陈旧奥林巴斯显微镜进行升级改造固定好的深度为1. 0mm。固定温度一般为4C,②以2%戊二醛和2%甲醛混合固定人肝,室温4小时、固定深度为2. 0mm, 12小时为2.5mm, 24小时5. 0mm,③改造用4写戊二醛室温下24小时,升级固定深度为4.5mm; 4t, 24小时,固定深度为2. 5mm
改造固定液均用缓冲液配制。改造升级缓冲液的作用是维持pH和渗透压等,使组织在固定的过程中不致破坏。奥林巴斯显微镜一般pH要求在7.2-7-4.固定时,如何对陈旧奥林巴斯显微镜进行升级改造升级细胞的渗透压可能改变,在有些情况下,固定液的渗透压对固定效果有影响,升级一般用等渗或高渗的固定液,要看实际的效果来决定。
奥林巴斯显微镜常用的缓冲液有磷酸盐缓冲液、升级二甲肿酸盐缓冲液和钠缓冲液等。
奥林巴斯显微镜选择缓冲液的条件:①不能与固定剂起反应,如何对陈旧奥林巴斯显微镜进行升级改造
升级从而降低其缓冲作用。如含氨的缓冲液与醛起反应。②一些缓冲液从组织中提取物质,升级则不适用.
磷酸盐缓冲液(phosphate buffer solution PBS)动物组织细胞外液主要是磷酸钠,接近生活环境的生理状态,改造对培养细胞的生长无毒性作用.其pH值为7.2一7.4,在不同温度下有微小变化。冷藏可保存数周;改造不能加葡萄搪或蔗糖,升级如加糖贮存时易发生污染或沉淀。改造一般是原液(A, B液)保存,工作液是现用现配制。奥林巴斯显微镜改造PBS的缺点是能提取部分非染色体蛋白质,使核物质减少.出现人工假像,如何对陈旧奥林巴斯显微镜进行升级改造
改造肺泡上皮I、I型细胞表面出现电子致密的升级大小不等的显微镜价格球形顺粒。
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