金相显微镜整机组成部分以及原理
透射金相显微镜下一样，需要将酶反应产物转变成含有重金属(如锹)的沉淀。金相显微镜在扫描电镜下，通过收集这些重金属元素的背散射电子信号来确定酶的位置并从而定位抗原。
奥林巴斯金相显微镜图6-4是上述几种情况的模式图。从上面的讨论可知。用千观察免疫细胞化学样品的扫描电镜备有二次电子和背散射电子的两种探测器。金相显微镜由于铁蛋白直径较小，而且只能观察二次电子像，因此适用于研究表面结构简单的对象，如红细胞或纤维束表面的抗原。胶体金的背散射电子像使其在电镜下辨认毫无困难.金相显微镜但是背散射电子像不能显示细胞的表面形态，金相显微镜因此同时观察二次电子像.在新型的扫描电镜中，这两种信号的图像可用不同颜色显示出来，并重益在一张照片上.
金相显微镜对血细胞这样的游离细胞先将其贴附于盖玻片上，以便后面的处理。贴附细胞的盖玻片表面宜硬盖一层聚赖氨酸，为此，可将清洁的盖玻片浸于1 mg/ml的聚赖氨酸水溶液中，半小时，水冲洗，空气干燥，紫外线灭菌。金相显微镜将细胞在这样的盖片上孵育适当时间.直到有足够细胞贴附于其表面。如研究的为培养细胞，尼康金相显微镜可令细胞直接在盖片上生长，也可在复有Formvar和碳膜的金或铂载网上培养。后者对于在扫描与透射电镜下对整装细胞(whole -cell mount)进行比较研究时特别有用。
尼康金相显微镜的细胞用PBS或培养液冲洗.如用培养液冲洗，金相显微镜其中不应含有血清或其它蛋白质，以避免这些物质在细胞表面的吸附。
金相显微镜与透射电镜下的免疫细胞化学方法一样，固定条件因细胞，国产金相显微镜抗原种类而异。常用固定剂成份为3%-4%多聚甲醛和。.1写~0.5肠戊二醛，用0. lmol/L磷酸缓冲液或19:L}配制，必7.4。也可用PLP固定剂。金相显微镜如研究的是植物凝集素受体，可以使用1.25肠戊二醛一IaZ&作固定液。固定液的渗透压必须仔细控制，金相显微镜因为它会对细胞表面形态发生明显影响。固定条件为室温,10^-30分钟.固定后用PBS冲洗。
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