2025年04月23日 08:46:48 来源：郑州今农智慧农业科技有限公司 >> 进入该公司展台 阅读量：1
屠宰企业非洲猪瘟检测实验室建设要求
（一）屠宰企业非洲猪瘟检测实验室实验室布局
屠宰企业非洲猪瘟检测实验室物理分区为检测区和消毒区。
1、检测区：应进一步分为样品处理区、配液区、扩增区，严格分区操作。应配置的仪器设备及耗材有：组织破碎仪（均质器/匀浆仪）、普通离心机、涡旋振荡器、移液器及其配套吸头（样品处理区和配液区各一套移液器，不能混用）。此外，需配备冰箱至少1台（存放检测试剂、检测样品、灭菌后废弃物）、储物柜（存放EP管、PCR管、枪头等耗材）、垃圾桶2个（1个配备黑色垃圾袋，用于盛放普通垃圾；另1个配备黄色废弃物专用垃圾袋，用于盛放废弃物）。
2、消毒区：主要用于废弃物处理，应配备高压灭菌锅、纯水仪、高压灭菌袋、高压灭菌指示条。
（二）屠宰企业非洲猪瘟检测实验室仪器设备及耗材
1、屠宰企业非洲猪瘟检测实验室仪器设备：组织破碎仪（均质器/匀浆仪）、普通离心机、涡旋振荡器、荧光PCR仪、高压灭菌锅、冷藏冷冻冰箱、移液器（量程为10ul、200ul、1ml）及配套吸头。
2、实验耗材：（或注射器）、真空采血管（EDTA抗凝剂）、1.5mLEP管及其管架、PCR八联管（与荧光PCR仪配套）及其管架、剪刀、镊子等。
3、检测试剂：应使用批准或经中国动物疫病预防控制中心比对符合要求的检测方法及检测试剂盒开展检测。
4、个人防护用品：实验服、一次性乳胶手套、一次性口罩、一次性鞋套。
序号 仪器设备名称 规格型号要求 数量 用途 1 常量天平 感量 0.01g ≥1 常规称量， 2 精密天平 感量 0.1mg ≥1 精密称量、标准物质称量， 3 酶标仪 JN-MBY96 ≥1 快速筛查检测，波长可调 4 pH 计 JN-PH ≥1 酸度测定，精度±0.01 5 冷藏设备 0℃-4℃ ≥2 存放样品和试剂标准物质， 6 冷冻设备 ＜-16℃ ≥2 存放样品和试剂标准物质， 7 离心机 转速不低于 5000r/min ≥1 样品前处理分离， 8 温度计 分辨率：0.1℃ ≥1 环境温度测量， 9 电子温湿度计 1%-99%；分辨率：0.1% ≥1 环境湿度测量， 10 样品均质器 ≥1 粉碎制备样品 11 振荡器 振速不低于 300 r/min ≥1 振荡混合左右， 12 恒温水浴锅 0-100℃ ≥1 恒温水浴加热， 13 微量移液器 1 20 μL-200 μL ≥1 准确移取体积， 14 微量移液器 2 100 μL-1000 μL ≥1 准确移取体积， 15 微量移液器 3 1 mL-5 mL ≥1 准确移取体积， 16 半定量定氮装置 ≥1 符合国标测定挥发性盐基氮的要求 17 酸式滴定管 0 mL-50 mL，精度±0.1mL ≥1 滴定测量， 18 碱式滴定管 0 mL-50 mL，精度±0.1mL ≥1 滴定测量， 19 电热干燥箱 0 ℃-300 ℃，精度±1 ℃ ≥1 20 电加热板/炉 0 ℃-150 ℃，精度±1 ℃ ≥1 21 高压灭菌器 ≥1 微生物检测中灭菌 22 显微镜 ≥1 旋毛虫、囊虫观察 23 生物安全柜 ≥1 微生物检测、非洲猪瘟检测 24 玻璃器皿 若干 容量瓶、移液管、量筒、烧杯、三角瓶等 25 荧光定量 PCR 仪 JN-YGDL2 ≥1 非洲猪瘟检测 26 肉类水分测定仪 JN-WT ≥1 快速测定肉类水分含量 27 瘦肉精快检卡 ≥1 快速定性筛查是否含有瘦肉精
（三）屠宰企业非洲猪瘟检测实验室检测人员
至少2名检测人员，负责样品检测和结果报告。检测人员应接受实验室检测技术及生物安全相关知识培训，熟悉分子生物学检测。
二、屠宰企业非洲猪瘟检测实验室操作规范
（一）屠宰企业非洲猪瘟检测实验室样品采集
驻场兽医负责样品采集，并填好采样记录表（见附表1）。样品为生猪抗凝血（5mL，0.5%EDTA抗凝，不能使用作为抗凝剂）或全血样品。
屠宰企业非洲猪瘟检测实验室样品包装
样品包装须符合《高致病性动物病原微生物菌（毒）或者样本运输包装规范》要求。
屠宰企业非洲猪瘟检测实验室样品保存
在12h内检测的样品可暂存于4℃冰箱保存，超过12h不能检测的样品则置于-20℃或-70℃冰箱保存。已检样品应至少保存6个月，以备复查。
屠宰企业非洲猪瘟检测实验室样品运输
由专人将样品送至实验室，必要时安排专车送达，禁止使用公共交通工具。
屠宰企业非洲猪瘟检测实验室样品接收、开箱
接到样品时，首先应检查外包装有无损坏，并进行登记，如有破损应立即报告驻场兽医。不管外包装有无损坏，都要在外包装（冷藏箱或泡沫箱）四周喷洒消毒剂（含2.3%有效氯的次氯酸盐），作用30 分钟（为防止喷洒的消毒液干燥，中途再喷洒一次）。开箱后在样品箱内侧充分喷洒消毒剂，翻动冰袋，再次喷洒，保证所有角落和内壁均被喷洒消毒剂。样品箱的消毒、样品取出等动作应轻缓，以减少气溶胶产生。
屠宰企业非洲猪瘟检测实验室样品检测
严格按照试剂说明书的操作步骤进行检测。
熟悉操作，缩短检测过程，以减少各种有害因素对核酸的破坏。
所有试剂开盖前都应先瞬时离心，避免液体飞溅；若液体不小心溅到手套或桌面上，应立刻更换手套并用稀酸擦拭桌面。
样品处理、配液、扩增严格分区，仪器、耗材等严禁交叉混用。
加样时严禁吹打。
荧光探针应避光保存，反应液现配现用，加入核酸后应尽快上机。
不要在荧光定量PCR管盖的采光部位做任何标记，不能用手接触PCR管
盖上的采光部位。
原始记录
实验完成后应填写并保存相关检测原始记录（见附表2），检测原始记录、PCR图至少保存5年。
屠宰企业非洲猪瘟检测实验室检测报告
根据《关于全面开展生猪屠宰环节非洲猪瘟检测工作有关具体要求的通知》（川动监[2019]5号）要求，屠宰企业检测结果应规范出具《检测报告》（见附表3），载明对应的检疫合格证明编号、检测方法、检测日期、检测结果。检测报告必须经由报告编制人、驻场兽医和批准人（场点负责人）签字确认，加盖屠宰企业公章方为有效。检测报告一式两份，一份交企业所在县（市、区）动物疫病预防控制中心存档，一份为屠宰企业自行留存，保存期至少5年。
（九）结果处理
1、检测结果为阴性，同批生猪产品上市销售。
2、检测结果为阳性，应立即停止生产，将检测结果报告驻场兽医，并及时将阳性样品送所在县级动物疫病预防控制中心，待复核后再做处理。复核为阳性的按照《非洲猪瘟疫情应急实施方案（2019年版）》的规定采取应急处置措施处理。
三、屠宰企业非洲猪瘟检测实验室生物安全要求
（一）采样生物安全
1、正确穿戴好口罩、手套、鞋套、实验服等个人防护用品。
2、尽可能使用物理设备保定动物，既保证人的安全，又保证样品质量。
3、一头猪一个注射器或一个真空，避免样品交叉污染。
4、采样结束，采样人员脱去个人防护用品，并对采样环境清洁消毒。
（二）检测过程中的生物安全
1、检查样品外包装有无损坏，并对外包装进行消毒。
2、注射器使用完后必须放置于专用废弃盒中待高压灭菌处理，高压灭菌前不得拆卸针头和注射器。
3、尽量使用带滤芯的移液器吸头，不用移液器混匀液体。
4、对于管壁上沾有悬液的离心管，应短暂离心后再打开管盖。
5、核酸提取完成后应在更换手套后再进行配液。
6、配液区和核酸提取区严格分开，仪器、耗材等严禁交叉混用。
（三）检测后实验室消毒
1、实验室台面、桌椅、橱柜、门把手、水龙头等物品的表面可用有效氯浓度为0.1%-0.5%的消毒剂喷洒，作用30min后用清水擦拭。
2、实验室地面可用有效氯浓度为0.1%-0.5%的消毒剂喷雾或拖地，各实验室拖把应专用，不得混用。
3、废液缸、剪刀、镊子等可回收物，用消毒液浸泡30min后用清水清洗，可高温灭菌的用牛皮纸等包好后高压（121℃，20min）灭菌备用。
4、实验服等可重复利用的棉织制品，可经121℃、20min高压灭菌、清洗后使用，也可用氯化物、酚化物等消毒剂浸泡30min，清水清洗后晾干备用。
5、仪器设备：组织匀浆仪、离心机、PCR仪等设备的金属部件使用75%乙醇擦拭消毒，非金属部件可使用含2.3%有效氯的次氯酸盐消毒30min，然后清水洗净或擦拭。
（四）屠宰企业非洲猪瘟检测实验室废弃物处理
1、以下废弃物需进行高压灭菌处理：（1）超过留存期的所有样品；（2）使用后的枪头、EP管、等；（3）一次性个人防护用品，如口罩、手套、鞋套等；（4）注射器针头等锐器使用后应直接弃置于耐高压、防穿透的容器内。将上述废弃物放入医疗废物袋，并在废物袋的中心位置放置高压指示带或化学指示卡，袋口应稍微扎口（不能太紧），袋口和外表面喷洒消毒剂，121℃高压蒸汽处理20分钟，然后将灭菌后的废弃物存放在冰柜中，定期交由有资质的无害化处理公司进行无害化处理。
2、使用后的PCR反应管（内含反应产物）直接弃置于医疗废物袋中，禁止开盖（以免造成气溶胶污染），交由无害化公司处理或者焚烧处理。
