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为什么PCR仪在使用中会出现扩增带异常!

2025年04月26日 09:51:09      来源:上海靳澜仪器制造有限公司 >> 进入该公司展台      阅读量:28

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  目前市场主流的PCR仪从使用特性上说,基本上分为常规型PCR仪、梯度PCR仪、原位PCR仪以及功能相对更强大的数字型PCR仪(荧光定量PCR仪),梯度和原位PCR仪分别是在常规型的基础上增加了原位模块和梯度温度的功能。具体分类,大家可以去浏览我司之前给大家分析过的PCR仪分类这篇文章,今天在这里就不给大家重复叙述了;本篇文章以前三种PCR仪作为案例给大家简单分析下,后面再给大家描述数字型PCR仪异常的原因。如果我们在使用PCR仪的过程中,若出现扩增带异常,该怎么去处理,该如何更好的去规避它呢?PCR仪厂家告诉大家PCR仪扩增条带异常的原因

一、内在因素:(多数发生在样品池)
①:多数蛋白质和特殊存在于染色体中的组蛋白,在样品池中去分解和吸收,没有被很好的去利用造成残留。
②:引入样品池中的蛋白纯度不高或者存在污染源。
③:样品池中残留有酶抑制剂taq,使酶失活造成不可逆。
④:在样品池中制备的时候,化合物中酚类容易被挥发导致实际含量低或者在样品池中吸收过于饱和。
⑤:操作员流动性大或者没有固定的制备程序,导致消化液的浓度成分存在差异,分解的能力差异化。
⑥:核酸的萃取工艺存在缺陷,导致样品中浓度不足。

二、外在因素:
①:PCR仪的扩增标准是以微升(ul)为单位的,靳澜系列PCR仪标准状态下,多为30或者50微升;在能确定PCR扩增反应量平稳状态下,则可继续保持20微升的含量。具体根据操作者的经验来确定,如不确定,当以中间为准,缓慢增加或者递减。
②:二阶离子和阳离子成分含量偏高或者偏低,影响PCR仪在扩增中的产生效率,从而导致扩增的示警。
③:若存在两种引入物,相对浓度偏差大,较严重的不对称也会降低扩增的效率。(具体在引入物的多少、引入物的成分)
④:更换活性酶,提高扩增中的活性度。
 
以上就是今天给大家总结的几点造成PCR仪扩增异常的几个因素,具体原因具体对待,欢迎致电我司

文章来源 :上海靳澜仪器制造有限公司/

为什么PCR仪在使用中会出现扩增带异常!

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