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血清一氧化氮NO含量检测方法推荐

2025年11月27日 09:35:41      来源:上海劲马实验设备有限公司 >> 进入该公司展台      阅读量:2

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一氧化氮(NO)试剂盒说明书

硝酸还原酶法

一、实验仪器:

试管、微量移液器、旋涡混匀器、离心机、37°C 恒温水浴锅,可见分光光度计(550nm) 二、适用范围:

试剂盒可测血清、血浆、培养细胞、培养液及动植物组织样本中 NO 含量 三、测定意义:

氧化氮(  NO  )是近来生科学究领中zui点课之一与心管、经、肠、尿、

疫系统肾病肝病尿肿瘤感染管移排斥应和功能控等有密关 系。NO是一种新的免疫分子和炎症介质、介导内毒素、TNF、IL-1β、IL-6 等细胞因子的病理作用。

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NO化学质活代谢化为硝酸盐(NO2  )(NO3  )血清NO2  NO3  浓度和 (NO2  + NO3  )

-             -

才能准确代表体内NO水平。血清  (NO2  +NO3  ) 含量测定,国内有的单位采用金属镉还原法,但该

-                                                                                             -                             -

琐 (血清需除蛋白),反应不易控制  (金属镉可将NO2  还原)不能全将NO3  还原NO2  

确性。 四、操作表:

 

 

空白管

标准管

测定管

双  蒸  水 (ml)

0.1

 

 

100μmol/L 标准应用液  (ml)

 

0.1

 

样本  (ml)

 

 

0.1

试剂一  (ml)

0.2

0.2

0.2

试剂二  (ml)

0.2

0.2

0.2

混匀,37℃准确水浴 60 分钟

 

试剂三  (ml)

0.2

0.2

0.2

试剂四  (ml)

0.1

0.1

0.1

充分旋涡混匀 30 秒,室温静置 10 分钟,3500~4000  转/分,离心 10 分钟,取上清显色。

 

上清(ml)

0.5

0.5

0.5

显色剂  (ml)

0.6

0.6

0.6

混匀,室温静置 10 分钟,蒸馏水调零,550nm,0.5cm 光径,测各管吸光度值。

 

五、计算公式:

 

1清(浆)中 NO 含量计算公式:

 

NO含量

 

测定OD OD值        标准品浓度      样品测试前

=                                           ×                          ×

 

(μ mol / L)

 

标准OD OD

 

(100μ mol / L)

 

稀释倍数

 

2组织样本中 NO 含量计算公式

 

NO含量

 

测定OD 空白OD

=                                           ×

 

标准品浓度

 

待测样本白浓度

÷

 

(μ mol / gprot*)

 

标准OD 空白OD

 

(20μ mol / L * *)            ( gprot / L)

 

 

 

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