2025年12月14日 08:40:47 来源：沧州泰鼎恒业试验仪器有限公司 >> 进入该公司展台 阅读量：0
附 录 A
(资料性)
培养基制备
A.1 营养盐溶液
A.1.1 配方
硝酸钠(NaNO₃) | 2.0g |
磷酸二氢钾(KH₂PO₄) | 0.70g |
(K₂HPO₄) | 0.30g |
(KCl) | 0.25g |
(MgSO₄·7H₂O) | 0.50g |
(FeSO₄·7H₂O) | 0.002g |
蔗糖(C₁₂H₂₂O) | 5.0g |
水 | 1000 mL |
A.1.2 未灭菌营养盐溶液制备方法
用电子天平(6.1.15)称取 A.1.1 各成分于烧杯中，先加适量的水加热溶解后，继续加水至1000 mL,加入0.1 mol/L 的氢氧化钠溶液和0.1 mol/L 盐酸，用 pH 计(6.1.16)测量，调节pH 至6.0～6.5。
A.1.3 无菌营养盐溶液制备方法
将按 A.1.2 制备的未灭菌营养盐溶液放入高压蒸汽灭菌锅(6.1.1)于(121±2)℃灭菌20 min 后冷却。
A.2 营养盐琼脂培养基
用电子天平(6.1.15)称取20.0g 琼脂于按A.1.2 制备的1000 mL 未灭菌营养盐溶液中，加热溶解后，加入0.1 mol/L 的氢氧化钠溶液和0.1 mol/L 盐酸，用pH 计(6.1.16)测量，调节pH 至6.0~6.5,用 高压蒸汽灭菌锅(6.1.1)于(121±2)℃灭菌20min 。向无菌培养皿(6.1.9)中注入灭菌后的培养基，凝固 后备用。
A.3 马铃薯-葡萄糖琼脂(PDA) 培养基
A.3.1 配方
马铃薯(去皮) | 300.0g |
葡萄糖 | 20.0g |
琼脂 | 20.0g |
水 | 1000 mL |
A.3.2 制备方法
取新鲜无霉烂的马铃薯，去皮切片后称取300.0g 马铃薯于烧杯中，加入600 mL 水煮沸20 min 后用双层纱布过滤，取滤液。在滤液中加入 A.3.1 中的葡萄糖和琼脂，加入水至1000 mL, 加热溶解。加入0.1 mol/L 的氢氧化钠溶液和0.1 mol/L 盐酸，用pH 计(6.1.16)测量，调节pH 至6.0~6.5。也可用商品马铃薯-葡萄糖琼脂(PDA)培养基，按照其产品说明书要求制备。
随后，按10 mL/ 支分装于无色玻璃试管(6.1.17)内，用高压蒸汽灭菌锅(6.1.1)于(121±2)℃灭菌20 min,趁热取出试管并倾斜摆放，使试管与水平桌面夹角为3°~5°,自然凝固成斜面后备用。
