抑菌圈测量仪观察出现抑菌圈破裂的调整方式
2025年12月22日 08:50:32
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抑菌圈法是衡量杀菌防霉剂效果的一种方式,主要用于测定杀菌防霉剂对细菌、霉菌、酵母菌的抑菌作用,是定性或半定量的方法。通过杀菌防霉剂在琼脂平板上的扩散能力来初步筛选更有效的杀菌防霉剂品种。抑菌圈测量仪测量是微生物分析的经典方法。它是利用抑菌物质在涂布特定试验菌的琼脂培养基内成球形立体状扩散,抑制试验菌的繁殖,在抑菌物质的周围形成透明圈,即抑菌圈。在抑菌圈测量仪试验过程中,抑菌圈出现破裂或呈卵圆形、椭圆形等不正常形状时,可以从以下几个方面进行分析和调整:
1.钢管两端面不够平,使抗生素漏出,破坏了均匀扩散现象。双碟底面不平或制备琼脂培养基平板时工作台不水平,可造成基层厚度不均匀,因此应选择加工相同的钢管,两端面不同的切勿混用;挑选底平的双碟,调整工作台的水平。
2.玻璃双碟、钢管、钢管放置器等被抗生素液污染,会使抑菌圈破裂,有时甚至使试验菌被抑制,因此,在整个试验中要严格防止抗生素污染。
3.在制备琼脂培养基菌层时,培养基温度过高或受热时间过长,可造成试验菌部分被杀死或全部被杀死,使抑菌圈破裂甚至无菌。控制方法是根据菌种要求不同,将培养基均匀降温,温度平衡后,再加入试验菌。
4.在滴加抗生素溶液至钢管内时,毛细滴管口易溅出溶液滴在琼脂培养基表面,不易觉察,影响抑菌圈,因此滴加溶液时毛细滴管内不得有气泡,避免管口太细,毛细滴管距离钢管口不应太高。
5.琼脂培养基上钢管间隔距离太小而抑菌圈较大时,会形成互相影响的卵圆形或椭圆形的抑菌圈。调整抑菌圈的直径可解决此问题。如:增加菌层培养基内的试验菌量;降低抗生素溶液的浓度;调整稀释抗生素用的缓冲液的PH值或盐浓度;调整培养基的配方。
6.双碟培养过程中,温度不均匀,双碟上细菌生长速度不一致,造成抑菌圈小或不圆,影响抗生素在琼脂培养基内的扩散系数。因此在细菌培养过程中应使用水浴恒温培养箱,保证受热均匀。
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