内酰胺酶检测主要是针对治疗感染性疾病药物的检测，这类药物都具有抗菌活性部分--β-内酰胺环，这种酶是耐药细菌针对内酰胺类抗生素分泌的的，可以与β-内酰胺环结合，使β-内酰胺环裂解而被破坏，失去抗菌活性。
内酰胺酶检测主要就是检测内酰胺酶是否具有活性，其常用的方法有显色、酸定量、碘测量方法，及酶、β酰胺酶和P/C测定药盒法。β内酰胺酶破坏β内酰胺抗生素的β内酰胺环有两种作用机制。
一、大多数常见的β内酰胺酶有一个依赖发挥作用的机制，并且根据氨基酸序列组成分为三类(A，C和D)。通常它们的活性位点具有一个狭窄的纵形沟状结构，在沟的底部形成了一个空腔(氧阴离子袋)，这种疏松的构造容易弯曲，便于结合底物。由于β内酰胺环上的羰基碳在结合β内酰胺酶活性部位的时发生了不可逆的反应，结果使其成为开环物，进而重建了β内酰胺酶。这类酶对、、单内酰环类抗生素都有活性。
二、是一类不大多见的β内酰胺酶，被称为金属类β内酰胺酶，或B类β内酰胺酶。它们的特点是利用一个2价金属离子，绝大多数为锌离子，分别与或半结合，或同时与二者结合，并与β内酰胺类抗生素的羰基碳的酰胺键相互作用，使其不能发挥作用。这类酶主要对、、碳青酶烯类抗生素发挥作用，但对单内酰环类抗生素无效。
