淡紫灰链霉菌价格 培养温度: 35-37℃英文名称:Streptomyces lavendulae培养保藏法:培养后于4—6℃冰箱内保存。
仪器设备与器具:
1恒温培养箱:36±1℃。
2 1000ml三角烧瓶、1ml、10ml移液管。
3接种针。
4显微镜。
5超净工作台。
6玻片、酒精灯、洗耳球、试管架。
7天平:感量0.01g。
8灭菌釜。
9培养皿(直径为90mm)、试管,经121℃、30分钟灭菌。
10试管夹、酒精灯、秒表、载玻片
实验内容:
1.称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查
2.干热灭菌:装入待灭菌物品→升温→恒温→降温→开箱取物
3.高压蒸汽灭菌:加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒压→降压回零→排汽→取物→无菌检查
4.过滤除菌:组装灭菌→连接→压滤→无菌检查→清洗灭菌
保存方法:
传代保存法:培养基的浓度不宜过高,营养成分不宜过于丰富,尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。培养温度通常以稍低于生长温度为好。若为产酸菌种,则应在培养基中添加少量碳酸钙[3]。
液体石蜡覆盖保存法:该法较前一种方法保存菌种的时间更长,适用于霉菌、酵母菌、放线菌及需氧细菌等的保存。
悬液保存法:
① 蒸馏水保存法:适用于霉菌、酵母菌及绝大部分放线菌,将其菌体悬浮于蒸馏水中即可在室温下保存数年。本法应注意避免水分的蒸发。
② 糖液保存法:适用于酵母菌,如将其菌体悬浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗处保存,可长达10年。除此之外,也可使用缓冲液或食盐水等进行保存。
载体保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅胶保存法;④磁珠保存法;⑤麸皮保存法;⑥纸片(滤纸)保存法。
常用的冷冻保存法:
① 低温冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低温冷冻保存时使用螺旋口试管较为方便,也可在棉塞试管外包裹塑料薄膜。保存时菌液加量不宜过多,有些可添加保护剂。此外,也可用φ5mm的玻璃珠来吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器内,再放入低温冰箱内进行保存的。
② 干冰保存法(-70℃左右):即将菌种管插入干冰内,再置于冰箱内进行冷冻保存。
③ 液氮保存法(-196℃):是适用范围的微生物保存法。
Walker氏癌肉瘤256瘤株;W256胶质瘤细胞,U251细胞WEHI 231细胞,小鼠B细胞TCPP 四(4-羧苯基)卟吩](>97.0%(HPLC)(T))TCPP Tetrakis(4-carboxyphenyl)porphyrin]质量规格 gt;97.0%(HPLC)(T)
5637,人膀胱癌细胞Human偶氮甲碱H(>97.0%(T))Azomethine H质量规格 gt;97.0%(T)
CD180 Others Mouse小鼠CD180 / RP105人细胞裂解液(阳性对照) 5-磺基水杨酸sulfosalicyclic acid质量规格:AR
角质细胞培养基(特定)KM-d1-氨基-2-萘酚-4-磺酸1-Amino-2-naphthol-4-sulfonic Acid质量规格:AR
HA Others H5N1甲型流感H5N1 (A/whooper swan/Mongolia/244/2005)血凝素HA1 (Hemagglutinin)人细胞裂解液(阳性对照)利卡西平;10,11-二氢-10-羟基10,11-Dihydro-10-hydroxy Carbamazepine质量规格 gt;98%,美国进口原装
RCC-krause细胞,肾癌细胞 人细胞,CaSKi细胞 人内根壳细胞总RNAHHIRSC NA幼枝含断氧化马钱子甙(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Secoxyloganin
非洲绿猴肾细胞系/IgRCD4-;VERO/IgRCD4-醋酸钠(标准品)质量规格:HPLC法含量测定Acetate
FGFR4 Others Human人FGFR4 / FGF Receptor 4人细胞裂解液(阳性对照)(标准品)质量规格:HPLC法含量测定gluconate
小鼠B细胞杂交瘤细胞;SH3(标准品)质量规格:含量测定Sotalol
ERBB3 Others Rhesus恒河猴HER3 / ErbB3人细胞裂解液(阳性对照)标记13C3质量规格:美国进口Desonide - Labeled 13C3
PI3 Others Human人Elafin / WFDC14 / appin-2人细胞裂解液(阳性对照)固盐shēng huàshìjì容量:2~8°C50毫克
人T细胞白血病细胞;HuT 78姆沙伯W HP Chromosorb W-HP
人卵巢成纤维细胞(HOF) ( 5×105 )苯甲基磺酰sulfonyl Fluoride (≥98.5 329-98-6 1G通用试剂
CM-R048大鼠肠巨噬细胞培养基100mL二炎酸盐shēng huàshìjì容量:100克
小鼠色素瘤细胞;B16小鼠肝实质细胞培养基100mLD-Fructose 250g/500g/1kg/5kg原装Amresco 0226
淡紫灰链霉菌价格NeuroFectagen?神经细胞转染试剂盒SUDANRED7B7B超级暗红色粉末RTsigma
SERPINB6 Others Human人SerpinB6 / PI-6杆状病毒-昆虫细胞裂解液(阳性对照)肖醋布康坐Butoconczolq nitnctq 6487-77-1
人口腔表皮样癌细胞;KB软骨素B Chondroitin sulfate B (from por 54328-33-5 25MG通用试剂
HeLa 229细胞,细胞 人低分化胃癌细胞,MKN-45细胞 鼬肺上皮细胞;MV-1-Lu蛋白酶S,英文名或英文缩写:Protease S Aureus,级别:BR,4u/mg,规格:250克
tTA基因修饰的小鼠胰腺癌细胞(B类);Pan02-CAG-tTA-4B3(谷酰胺)
菌种培养:
⒈ 孢子制备
⑴ 放线菌孢子的制备
一般采用琼脂斜面培养基,培养基中含有一些适合产孢子的营养成分,如麸皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些无机盐等。碳源和氮源不要太丰富(碳源约为1%,氮源不超过0.5%),碳源丰富容易造成生理酸性的营养环境,不利于放线菌孢子的形成,氮源丰富则有利于菌丝繁殖而不利于孢子形成。一般情况下,干燥和限制营养可直接或间接诱导孢子形成。放线菌斜面的培养温度大多数为28℃,少数为37℃,培养时间为5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制备
霉菌的孢子培养,一般以大米、小米、玉米、麸皮、麦粒等天然农产品为培养基。这是由于这些农产品中的营养成分较适合霉菌的孢子繁殖,而且这类培养基的表面积较大,可获得大量的孢子。霉菌的培养一般为25~28℃,培养时间为4~14天。
⒉ 种子制备
⑴ 摇瓶种子制备
摇瓶种子进罐,常采用母瓶、子瓶两级培养,有时母瓶种子也可以直接进罐。种子培养基要求比较丰富和,并易被菌体分解利用,氮源丰富有利于菌丝生长。原则上各种营养成分不宜过浓,子瓶培养基浓度比母瓶略高,更接近种子罐的培养基配方。
⑵ 种子罐种子制备
种子罐种子制备的工艺过程,因菌种不同而异,一般可分为一级种子、二级种子和三级种子的制备。孢子(或摇瓶菌丝)被接入到体积较小的种子罐中,经培养后形成大量的菌丝,这样的种子称为一级种子,把一级种子转入发酵罐内发酵,称为二级发酵。如果将一级种子接入体积较大的种子罐内,经过培养形成更多的菌丝,这样制备的种子称为二级种子,将二级种子转入发酵罐内发酵,称为三级发酵。同样道理,使用三级种子的发酵,称为四级发酵。
仟渔 | / |
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