绵羊白介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在绵羊白介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
13519 ⅡA组磷脂酶A2(PLA2G2A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Phospholipase A2, Group IIA (PLA2G2A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13520 糖原合酶激酶3β(GSK3β)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glycogen Synthase Kinase 3 Beta (GSK3b) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13521 核糖核酸酶L(RNASEL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ribonuclease L (RNASEL) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13522 激活T-细胞核因子1(NFATC1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Nuclear Factor Of Activated T-Cells, Cytoplasmic 1 (NFATC1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13523 Osterix蛋白(OSX)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Osterix (OSX) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13524 C-型凝集素域家族2成员C(CLEC2C)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for C-Type Lectin Domain Family 2, Member C (CLEC2C) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13525 溶血磷脂酸受体3(LPAR3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Lysophosphatidic Acid Receptor 3 (LPAR3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13526 溶血磷脂酸受体3(LPAR3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Lysophosphatidic Acid Receptor 3 (LPAR3) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13527 胸腺旁腺素(PTMS)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Parathymosin (PTMS) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13528 脂解激活脂蛋白受体(LSR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Lipolysis Stimulated Lipoprotein Receptor (LSR) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13529 肌球蛋白重链4(MYH4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Myosin Heavy Chain 4, Skeletal Muscle (MYH4) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13530 细胞程序性死亡蛋白1配体1(PDCD1LG1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Programmed Cell Death Protein 1 Ligand 1 (PDCD1LG1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13531 同种异体移植炎症因子1(AIF1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Allograft Inflammatory Factor 1 (AIF1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13532 蛋白酶3(PR3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Proteinase 3 (PR3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13533 脱氢酶(XDH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Xanthine Dehydrogenase (XDH) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13534 钴胺传递蛋白Ⅱ(TCN2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Transcobalamin II, Macrocytic Anemia (TCN2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13535 血小板反应蛋白4(THBS4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Thrombospondin 4 (THBS4) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13536 血小板反应蛋白3(THBS3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Thrombospondin 3 (THBS3) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13537 外周鞘磷脂蛋白22(PMP22)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Peripheral Myelin Protein 22 (PMP22) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13538 外周鞘磷脂蛋白22(PMP22)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Peripheral Myelin Protein 22 (PMP22) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13539 1号染色体开放阅读框85(C1orf85)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Chromosome 1 Open Reading Frame 85 (C1orf85) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13540 醌NADH脱氢酶1(NQO1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for NADH Dehydrogenase, Quinone 1 (NQO1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13541 葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glucose Transporter 4 (GLUT4) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
13542 脂素1(LPIN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Lipin 1 (LPIN1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13543 卵泡抑素样蛋白3(FSTL3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Follistatin Like Protein 3 (FSTL3) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13544 甲硫氨酰氨肽酶2(METAP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Methionyl Aminopeptidase 2 (METAP2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13545 神经肽Y受体Y2(NPY2R)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neuropeptide Y Receptor Y2 (NPY2R) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13546 神经肽Y受体Y1(NPY1R)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neuropeptide Y Receptor Y1 (NPY1R) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13547 Anoctamin 6蛋白(ANO6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Anoctamin 6 (ANO6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13548 白三烯A4水解酶(LTA4H)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Leukotriene A4 Hydrolase (LTA4H) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13549 Ⅺ(F11)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Coagulation Factor XI (F11) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13550 肽聚糖识别蛋白1(PGLYRP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Peptidoglycan Recognition protein 1 (PGLYRP1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13551 17-β-羟基类固醇脱氢酶3(HSD17β3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for 17-Beta-Hydroxysteroid Dehydrogenase Type 3 (HSD17b3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13552 C-Raf原癌基因丝蛋白激酶(CRAF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for C-Raf Proto Oncogene Serine/Threonine Protein Kinase (CRAF) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13553 野鼠色基因相关蛋白(AGRP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Agouti Related Protein (AGRP) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13554 前胶原C端蛋白酶增强子1(PCPE1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Procollagen C Proteinase Enhancer 1 (PCPE1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13555 肿瘤坏死因子配体超家族成员13(TNFSF13)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Tumor Necrosis Factor Ligand Superfamily, Member 13 (TNFSF13) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13556 血小板反应蛋白4(THBS4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Thrombospondin 4 (THBS4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13557 转化受体电位阳离子通道亚家族V成员1(TRPV1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Transient Receptor Potential Cation Channel Subfamily V, Member 1 (TRPV1) 48T/96T Homo sapiens绵羊白介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒 (Human)
13558 早幼粒细胞白血病蛋白(PML)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Promyelocytic Leukemia Protein (PML) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13559 细胞胱硫醚γ裂解酶(CSE)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cystathionine Gamma Lyase (CSE) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不;洗板针堵塞,抽吸不;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5绵羊白介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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