Countess® II FL全自动细胞计数仪具有两路荧光通道。其所采集的荧光色通过插入单独的光立方进行测定。Countess® II FL全自动细胞计数仪提供有超过15种光立方可供选择,检测不受表达GFP和RFP的细胞的限制。对于转染了RFP表达载体,和蓝色核复染的细胞,,您是否希望测定其转染效率?没问题!您只需加入和RFP和DAPI光立方,即可对整个细胞群之中表达RFP融合的细胞进行高效地计数,同时还可地测定转染效率。
Countess® II FL全自动细胞计数仪所采用的EVOS®光立方。
Countess® II FL全自动细胞计数仪的荧光检测技术的核心是的EVOS® LED光立方。每个光立方含有一个LED、发光光学器件和滤光片。光立方具有插拔功能,可由用户更换,并通过Countess®系统进行自动配置。这些类型广泛的光立方为众多荧光研究应用(如细胞活力分析)提供了更大的灵活性。
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对应于Countess® II FL全自动细胞计数仪上常用的染料的荧光光立方
光立方 | 激发光谱(nm) | 发射光谱(nm) | 常用的相容染料/荧光蛋白 |
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DAPI | 357/44 | 447/60 | DAPI, Hoechst, BFP |
TagBFP | 390/18 | 447/60 | TagBFP |
CFP | 445/45 | 510/42 | ECFP, Lucifer Yellow |
GFP | 470/22 | 510/42 | GFP, Alexa Fluor® 488, SYBR® Green, FITC |
YFP | 500/24 | 524/27 | EYFP, acridine orange (+DNA) |
RFP | 531/40 | 593/40 | RFP, Alexa Fluor® 546, Fluor® 555, Cy®3, DsRed, Rhodamine Red, dTomato |
Texas Red® | 585/29 | 624/40 | Texas Red®, Alexa Fluor® 568, Alexa Fluor® 594, MitoTracker® Red, mCherry |
Cy®5 | 628/40 | 692/40 | Alexa Fluor® 647, Alexa Fluor® 660, DRAQ5® |
Cy®5.5 | 655/46 | 794/16 | Cy®5.5
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可重复使用或一次性玻片
一次性玻片和枪头的安装成本使得很多实验室打消了了停用繁琐的手动细胞计数的念头。为此,Countess® II FL全自动细胞计数仪采用了可选配可重复使用的玻璃玻片的设计,从而显著降低了自动细胞计数的长期耗材成本。而针对那些希望享受到一次性玻片便利的研究人员,Countess® II FL全自动细胞计数仪也支持使用针对原版Countess®细胞计数仪开发的同款PMMA塑料玻片。
精密、地计数
Countess® II FL全自动细胞计数仪内含*的自动聚焦计数和计数算法,使您可以快速、地识别并计数细胞群之中的细胞。在插入玻片之后,Countess® II FL全自动细胞计数仪即可自动对细胞进行对焦,从而帮助用户消除与手动对焦机制有关的人为波动。密度为1 x 104至1 x 107细胞/mL 的悬液之中的大小介于5 μm至60 μm之间的细胞,宜采用此方法进行计数。
采用Countess® II FL全自动细胞计数仪进行的细胞计数。在含有0.4%台盼兰染色剂溶液的悬液中将NIH/3T3、HeLa和HL-60细胞按照1:1的比例混合,然后通过台盼蓝排除法进行计数。取10 μL的样品加入到腔室玻片上并将玻片插入到Countess® II FL全自动细胞计数仪中(蓝条)或采用血细胞计数仪通过显微镜手动计数(紫条)。每一个竖条表示平均10个细胞计数, 标准偏差如图所示。Countess® II FL全自动细胞计数仪的自动对焦和高级计数算法具有更高的细胞计数度,而手动计数则出现了图示的偏差。
细胞成块?
采用Countess® II FL全自动细胞计数仪时这也不是问题。无论您采用自动还是手动细胞计数方法,在对含有成块细胞的样品进行计数时,都难以获得的细胞计数结果。而Countess® II FL全自动细胞计数仪的*计数算法可以清晰地细胞块内的细胞边界,因而即使是成团块样品也可进行、精密的细胞计数。
自动细胞计数 – 即便面对成块样品时。在含有0.4%台盼兰染色剂溶液的悬液中将NIH/3T3细胞按照1:1的比例混合,然后取10 μL的样品加入到腔室玻片上并将玻片插入到Countess® II FL全自动细胞计数仪中。Countess® II FL全自动细胞计数仪的分割和计数算法可以对细胞块进行解析,并根据台盼蓝排除法进行活/死细胞评分。在本实验之中的样品之中,共计数出了3.09 x 106的活细胞(不含台盼蓝染色剂)和5.86 x 103的死细胞(积聚了台盼蓝染色剂)。
Countess® II和Countess® II FL全自动细胞计数仪之比较
特征 | Countess® II | Countess® II FL
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自动对焦 |
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触摸屏 |
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明场计数 |
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一次性玻片 |
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可重复使用玻片 |
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